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HE染色操作步驟

來源：懂視網(wǎng) 責(zé)編：小OO 時間：2020-03-19 18:42:47

導(dǎo)讀蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining)，簡稱HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。下面介紹。材料/工具甲醛二甲苯酒精蘇木精水溶液，酒精伊紅染方法取材，固定：固定液——甲醛（福爾馬林）從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0．5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(...

蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，簡稱HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。下面介紹。

材料/工具

甲醛二甲苯酒精蘇木精水溶液，酒精伊紅染

方法

取材，固定：固定液——甲醛（）
從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0．5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10％，Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質(zhì)變性凝固，以防止細胞死后的自溶或細菌的分解，從而保持細胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

修剪，脫水，透明：脫水劑——酒精透明劑——二甲苯
不同組織固定時間不同，固定成功后需要修剪25px*25px*5px，放入包埋盒中，流水沖洗（去除組織中的固定液）30分鐘。至于不同濃度的酒精脫水，一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明，以二甲苯替換出組織塊的中酒精，才能浸蠟包埋。

浸蠟，包埋：石蠟
將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中，放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋，冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬，才能在切片機上切成很薄的切片。

切片、展片、烤片：
將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片，一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折，要放到加熱的水中燙平，再貼到載玻片上，放45℃恒溫箱中烘干。

脫蠟、至水、染色：脫蠟劑：二甲苯至水劑：酒精染色劑：蘇木精水溶液，酒精伊紅染

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