MGB的意思是小溝結(jié)合，全稱是MinorGrooveBinder。Taqman就是一個(gè)商標(biāo)，不是縮寫，就是全稱，這兩個(gè)都是用來描述熒光定量PCR中使用的探針。Taqman探針兩端分別帶有熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)，在正常狀態(tài)下，探針上的熒光被淬滅...
原理：針對(duì)Taqman探針熒光淬滅不徹底的問題，2000年美國(guó)ABI公司推出了一種新TaqMan探針——MGB探針（minorgroovebinderoligodeoxynucleotideconjugate,MGB-ODN)，3'端采用了非熒光性的淬滅基因——淬滅基團(tuán)吸收?qǐng)?bào)告基團(tuán)的能量后并...
同時(shí)探針上還連接有MGB(MinorGrooveBinder)修飾基團(tuán),可以將探針的Tm值提高10°C左右。因此為了獲得同樣的Tm值,MGB探針可以比普通TaqMan探針設(shè)計(jì)得更短,既降低了合成成本,也使得探針設(shè)計(jì)的成功率大為提高——因?yàn)樵谀０宓腄NA堿基組成不...
2.TaqMan探針法：探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有...
Real-timeqPCR中最常用的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能...
MGB的意思是小溝結(jié)合,全稱是MinorGrooveBinder.Taqman就是一個(gè)商標(biāo),不是縮寫,就是全稱,這兩個(gè)都是用來描述熒光定量PCR中使用的探針.Taqman探針兩端分別帶有熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán),在正常狀態(tài)下,探針上的熒光被...
使報(bào)告熒光基團(tuán)淬滅熒光基團(tuán)離,熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接收熒光信號(hào),即每擴(kuò)增條DNA鏈,熒光形,實(shí)現(xiàn)熒光信號(hào)累積與PCR產(chǎn)物形完全同步.用熒光基團(tuán)FAM,TET,VIC,HEX.新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既進(jìn)行基定量析,析基突變（SNP）,望基診斷體...
原則上MGB探針只要有一個(gè)堿基突變,MGB探針就會(huì)檢測(cè)到(MGB探針將不會(huì)與目的片段雜交,不產(chǎn)生熒光信號(hào))。因此,在進(jìn)行SNP檢測(cè)時(shí),為了檢測(cè)到突變子,即TaqmanMGB不與目的片段雜交,不產(chǎn)生熒光信號(hào),探針目的片段產(chǎn)生熒光信號(hào)檢測(cè)將探針的突變位點(diǎn)...
二、TaqMan探針法TaqMan探針法PCR擴(kuò)增時(shí)，在加入一對(duì)擴(kuò)增引物的同時(shí)再加入一個(gè)特異性的熒光探針。Taqman探針為一段線性的寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)熒光報(bào)告基團(tuán)（FAM或Hex等）和一個(gè)熒光淬滅基團(tuán)，當(dāng)探針完整時(shí)...
正常情況下是不需要的,溶解曲線是在SYBRGreen法中利用染料在DNA解鏈時(shí)釋放不發(fā)射熒光,而在DNA雙鏈時(shí)與其結(jié)合發(fā)射熒光的原理制作溶解曲線的,而Taqman探針在PCR反應(yīng)時(shí)其寡核苷酸鏈由于被DNA聚合酶的外切酶活性給切斷,所以不能...
2024/7/30
2024/7/30